www.chemia2009.fora.pl

kaczoryna

czy ktoś mógłby mi udzielić odpowiedzi na takie 2 pytania:

1. dwa białka różniące się masą (20 kDa i 35kDa) poddano rozdziałowi na kolumnie wypełnionej żelem Sephadex G-50. W efekcie otrzymano jeden sygnał będący mieszaniną obu związków. DLACZEGO?

2. Dwa białka o tej samej masie 30kDa naniesiono na kolumne chromatograficzną wypełnioną żelem sephadex G-75. W wyniku otrzymano 2 sygnały: obj elucyjna jednego z nich to 100 ml a drugiego 130ml. Czym wytłumaczysz różnice?

Plisssska Smile

inussia

1) ponieważ mimo tego, że w sączeniu molekularnym cząsteczki są rozdzielane ze względu na wielkość, to zastosowano złe złoże- cząsteczki są dużo mniejsze (bo 20 i 35) a mamy sephadex 50, więc obie "przeleciały" przez żel i powstało jedno pasmo. Trzeba by zastosować złoże sephadex z mniejszym usieciowieniem żeby można to było zróżnicować. Białka mało różnią się wielkością i to jest powodem tego, że powstało jedno pasmo
2) w sącz. molek. następuje rozdział ze względu na wielkość i kształt, a nie na masę. Powstały dwa sygnały, więc cząst. muszą różnić się wielkością.

aga714

mozecie wiecej takich pytań wrzucić? Wink

)

kaczoryna

Dane są 3 peptydy o sekwecji: a) Arg-Lys-Phe-Arg-Lys-Trp-Val, b) Gln-Val-Ala-Thr-Ser-Ile-Ser c) Ala-Asp-Glu-Asn-Gln-Asp-Glu

Stosując techniki chromatograficzne zaproponuj metodę rozdziału wyżej wymienionych związków..

???

inka

podział na kwas, zasadę i związki obojętne (może?)
kwas: Asp, Glu
zasada: Lys, Arg
obojętne: Ala, Val, Ile, Thr, Ser

kaczoryna

tylko ze ich jest cholera po 7 w każdym i teraz mam ładunek całkowity okreslać? no tylko co myślisz że musmy znać ładunki wszystkich występujących aminokwasów?;/

Gotfryda

jak tam chcesz odpowiedzi do pytan to moze wrzuc od razu wszystkie ?

inka

nie wiem dokładnie, naprawdę.. ale może chociaż za takie pobieżne określenie będzie możliwość otrzymania cząstkowych pkt?

kaczoryna

[link widoczny dla zalogowanych]

Pati_tek

nie wiem czy dobrze rozumiem 2pyt z tymi białkami?, ze jedno jest 20kDa a drugie 35kDa, oba te białka nie mieszczą sie w granicy frakcjonowania sephadex 50 ( 500-10000 Da) wiec przechodzą przez żel i nie są zaadsorbowane do wnętrza i przechodzą odrazu jakby do obj pustej. wiec należy użyć sephadex z wiekszymi porami,z mniejszym usieciowaniem ale z takimi aby białko 20 kda przeszło przez te pory a białko 35 kda nie ?

inussia

Patitku - żel z mniejszymi porami, czyli z mniejszym usieciowieniem, wtedy właśnie jedno białko przejdzie, a drugie nie i powstaną dwa sygnały Smile

kaczoryna

a jak to sie przelicza ze np sephadex g-50 ... to jaki zakres szerokosci tych porow?

pariuszek

Hmm jeśli średnica białka jest mniejsze od średnicy porów sa dwie możliwości:
1. będą dyfundować w głab żelu i pojawią się w eluencie cąłkowiej objetości kolumny
2. przejdą przez żel
Dlaczego INUSSIA uważa że prawdopodobny jest akaurat wariant drugi. jakieś wytłumaczenie? Z góry dziękuję.

kaczoryna

mi sie wydaje że właśnie chyba ten wariant że przelecą jest bardziej prawdopodobny bo są znacznie mniejsze ...

inka

a potrafi ktoś to zrobić?
Niżej wymienione związki uszereguj wg rosnącej długości fali maksimum absorpcji: chlorobenzen, benzen, nitrobenzen, aminobenzen. Czym spowodowane są różnice w długości fali maksimum absorpcji tych związków?